酵母氫ATP酶活性酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書 |
點(diǎn)擊次數(shù):1447 更新時(shí)間:2016-07-13 |
主要用途 我公司酵母氫ATP酶(H+-ATPase)活性酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測試劑是一種旨在使用氫ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),在排除其它ATP酶干擾的情況下,受到氫ATP酶的水解產(chǎn)生的ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng), 即采用光譜法測定其氧化后吸光峰值(NADH濃度)的變化,以此進(jìn)行測算單位酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種酵母細(xì)胞H+-ATP酶的特異性活性檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。 注意事項(xiàng) 1. 本產(chǎn)品為21次操作,包括背景對(duì)照測定 2. 操作時(shí),須戴手套 3. 系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1次 4. 建議樣品忌用磷酸緩沖溶液、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、EDTA、EGTA等,可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等 5. 用戶如果檢測質(zhì)膜型氫ATP酶活性,建議使用真菌/酵母細(xì)胞膜蛋白(本公司提供可溶性真菌/酵母細(xì)胞膜蛋白粗提制備試劑盒30043.1) 6. 用戶如果檢測液泡型氫ATP酶活性,建議使用真菌/酵母細(xì)胞液泡蛋白(本公司提供真菌/酵母膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒10169.3) 7. 強(qiáng)化液(Reagent B)為固體狀,移取方法為:使用1毫升槍頭,將部分剪去;或使用0.5毫升PCR管的蓋子內(nèi)圈盛滿;或秤重0.1克 8. 加入樣品啟動(dòng)反應(yīng)后3秒內(nèi)即刻光譜測定 9. 反應(yīng)測定值由高到低變化;測定可以持續(xù)30分鐘 10. 測定值由高到低變化,即0分鐘測定讀數(shù)高于10分鐘或30分鐘測定讀數(shù),表明有酶活性 11. 光譜測定后,比色皿須清洗* 12. 建議待測樣本蛋白濃度為50微克/50微升;如果樣本酶活性過低或過高,則可以增加或降低樣本量;注意計(jì)算公式的調(diào)整(本公司提供 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1) 13. 樣品特異活性是指排除其它,包括鈣(EGTA處理)、鈉鉀(烏本苷;ouabain處理)等ATP酶的干擾后的氫ATP酶活性 14. 氫ATP酶活性單位濃度定義:在28℃溫度下,pH 7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作為一個(gè)活性單位 15. 本公司提供系列ATP酶類分析技術(shù)產(chǎn)品 如: |
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